Kami juga melakukan eksperimen PCR, mengapa hasilnya selalu jauh lebih buruk daripada yang lain?

Kami juga melakukan eksperimen PCR, mengapa hasilnya selalu jauh lebih buruk daripada yang lain?

Di laboratorium, lihat PCR orang lain, efisiensi amplifikasi tinggi, strip elektroforesis sempurna, dan lihat sendiri, sulit dilakukan untuk waktu yang lama, rasakan reaksinya sangat bagus, hasil tes positif palsu…… Apa masalah?

Saya percaya bahwa banyak dari mitra kami juga mengalami berbagai masalah.Ketika kita mengalami hambatan dalam percobaan PCR, kita secara tidak sadar akan menganalisis faktor-faktor dalam sistem reaksi, tetapi kita sering mengabaikan pengaruh penting bahan habis pakai dalam percobaan.

Hasil PCR Anda salah, bahan habis pakai PCR mungkin menjadi alasan penting.Di satu sisi, kontaminasi mikro bahan habis pakai atau pengenalan inhibitor akan menyebabkan polusi eksperimental;Di sisi lain, pemilihan bahan habis pakai yang tidak tepat juga akan membuat hasil eksperimen menderita.

Masalah datang lagi.Ada banyak jenis bahan habis pakai PCR, jadi bagaimana memilih yang tepat untuk membuat eksperimen lebih lancar?Apa saja masalah yang harus diperhatikan?Jangan khawatir, hari iniI dikombinasikan dengan pengalaman bertahun-tahun, memilah masalah umum pemilihan bahan habis pakai PCR, saya berharap dapat membantu Anda.

 

Q1: Mengapa bahan habis pakai PCR biasanya terbuat dari bahan PP?

Huida: Karena pasokan PCR biasanya bersentuhan langsung dengan reagen atau sampel, bahan polipropilen (PP) secara biologis inert, tidak melekat pada biomolekul, dan memiliki toleransi kimia dan toleransi suhu yang baik (dapat diautoklap pada 121° C, juga dapat menahan perubahan suhu selama siklus termal).

 

Q2: Bagaimana saya harus memilih di antara berbagai ukuran tabung/pelat PCR?

HUIDA: Tujuan seleksi: pilih produk yang tepat sesuai dengan persyaratan eksperimental tertentu.Sebagian besar ukuran tabung PCR dapat memenuhi persyaratan reaksi PCR.Atas dasar ini, disarankan untuk memilih tabung volume rendah terlebih dahulu.Karena tabung/pelat reaksi volume rendah memiliki ruang atas yang kecil, konduktivitas panas ditingkatkan dan penguapan berkurang.Pada saat yang sama, perlu untuk menghindari penambahan sampel yang terlalu banyak atau terlalu sedikit.Terlalu banyak dapat menyebabkan penurunan konduktivitas termal, tumpahan dan kontaminasi silang, sementara terlalu sedikit dapat menyebabkan hilangnya penguapan sampel.

Spesifikasi dan volume tabung reaksi umum:

Tabung tunggal/gabungan: 0.5ml, 0.2ml, 0.15ml

Piring 96-sumur: 0.2ml, 0.15ml

Pelat 384-sumur: 0,04ml

 

Q3: Ketika jumlah sampel kecil, saya akan memilih pipa tunggal atau pipa gabungan, tetapi mengapa beberapa memiliki penutup datar dan beberapa memiliki penutup cembung?

Huida: Ketika jumlah sampel kecil, tabung tunggal atau tabung gabungan akan lebih disukai.Namun, bila volume reaksi besar, tabung tunggal lebih dominan, dan volumenya bisa mencapai 0,5 mL.Dan penutup datar dan penutup cembung masing-masing memiliki keunggulan, spesifik dapat merujuk pada informasi berikut.

Tabung tunggal: 0.2ml dan 0.5ml;Dapat memilih jumlah sampel secara fleksibel.

Tabung penghubung: 0.2ml atau 0.15ml adalah opsional;8 atau 12 tabung yang umum.

Penutup datar: dapat memberikan transmisi sinyal fluoresensi yang akurat untuk qPCR;Mudah untuk menulis tanda.

Penutup cembung: kontak dengan penutup panas instrumen PCR untuk mengurangi deformasi tabung reaksi yang disebabkan oleh tekanan;Namun, itu akan mempengaruhi transmisi sinyal fluoresensi dan tidak dapat diterapkan pada percobaan qPCR.

 

Q4: Mengapa beberapa pelat PCR memiliki rok dan beberapa tidak?

Huida: Faktanya, bagian bawah pelat PCR dirancang agar lebih beradaptasi dengan aplikasi otomatisasi, memberikan dukungan yang stabil dan ketahanan mekanis untuk instrumen, serta stabilitas yang lebih tinggi selama proses pemipetan.

Pelat PCR umumnya dibagi menjadi non-hemline, half-hemline dan full-hemline.

TanpaPelat: Cocok untuk sebagian besar mesin PCR atau mesin qPCR, tetapi tidak untuk aplikasi otomatisasi.Stabilitasnya tidak tinggi dalam proses pemipetan, sehingga perlu digunakan dengan penyangga pelat.

Pelat tepi setengah rok: dapat disesuaikan dengan aplikasi label atau kode batang, dan aplikasi otomatis, dan memiliki stabilitas pemipaan yang baik.

Pelat tepi rok penuh: sangat cocok untuk aplikasi eksperimental otomatis, juga dapat disesuaikan dengan label dan penerapan kode batang.Ini memiliki kekuatan mekanik yang baik, dapat digunakan dalam instrumen PCR modul tonjolan, dan memiliki stabilitas tinggi dalam proses pemipetan.

 

Q5 :Untuk pelat PCR, mengapa sudut dan labelnya tidak sama?

Huida: Itu tergantung pada efek pemotongan sudut dan penandaan.

Pemotongan sudut: Pilihan posisi pemotongan sudut pelat PCR tergantung pada persyaratan instrumen yang sesuai untuk pemosisian yang mudah.

Identifikasi: Penanda alfanumerik pada pelat PCR membantu mengidentifikasi Sumur individu dan lokasi sampel.Umumnya untuk logo digital warna timbul atau logo terukir.Untuk beberapa aplikasi otomatis, pelat reaksi yang dicetak dan ditandai lebih baik disegel.

 

Q6: Mengapa beberapa pelat PCR cembung sementara yang lain datar?Mana yang lebih baik?

Huida: Yang paling cocok adalah yang terbaik.Ada dua jenis pelat PCR yang umum: margin pori datar dan margin pori tinggi.

Pelat reaksi margin lubang datar, cocok untuk sebagian besar peralatan PCR.

Pelat reaksi dengan tepi lubang yang naik memfasilitasi penyegelan membran dan mengurangi risiko kontaminasi silang antar sampel.

 

Huida memiliki pengalaman bertahun-tahun dalam produksi dan pemrosesan produk PCR dan standar industri yang tinggi.Lini produk kaya dan dapat memenuhi sebagian besar aplikasi eksperimental PCR.Datang dan pilih produk yang tepat untuk aplikasi eksperimental Anda.

谷歌推广疫情产品PCR


Waktu posting: Jun-03-2021

Kirim pesan Anda kepada kami:

Tulis pesan Anda di sini dan kirimkan kepada kami